Gram värvmine
Foto: Mati Roasto, 2012
Grami värvimise metoodika
1. Valmistada märgpreparaat, lasta sel õhu käes kuivada ja fikseerida termiliselt;
2. Fikseeritud preparaati värvida 1 minuti jooksul Huckeri kristallvioletiga (ammoonium-oksalaat-kristallviolett);
3. Pesta preparaati ettevaatlikult mõne sekundi jooksul dest.veega;
4. Asetada preparaadile tilk värsket Lugoli lahust 1 minutiks;
5. Preparaati pesta dest. veega;
6. Dekoloreerida preparaati kuni 30 sek. jooksul 96 % etanooliga;
7. Pesta preparaati 5 sek. jooksul dest. veega ja kuivatada ettevaatlikult filterpaberi ribadega;
8. Värvida preparaati 20-30 sek. jooksul 0,25 % safraniini lahusega;
9. Preparaat pesta, kuivatada ja mikroskoopida õliimmersioonsüsteemis
Lihtsustatud metoodika
1. Valmistada märgpreparaat, lasta sel õhu käes kuivada ja fikseerida termiliselt;
2. Fikseeritud preparaati värvida 1 minuti jooksul Huckeri kristallvioletiga (ammoonium-oksalaat-kristallviolett);
3. Pesta preparaati ettevaatlikult mõne sekundi jooksul dest.veega;
4. Asetada preparaadile tilk värsket Lugoli lahust 1 minutiks;
5. Preparaati pesta dest. veega;
6. Kasutada safraniin-dekoloreerivat lahust ning jätta sellega preparaat seisma 20-50 sekundiks;
7. Preparaat pesta lõplikult
Pärast safraniiniga värvimist värvuvad GN bakterid punaseks, GP bakterid jäävad violetseks.
KIIRMEETOD: Kanda alusklaasile 2 tilka 3% KOH lahust;
suspendeerida bakterite agarkultuuri rakke aluse tilgal, rakkude lüüsil tekivad viskoossed niidid GN bakterite puhul.
2. Fikseeritud preparaati värvida 1 minuti jooksul Huckeri kristallvioletiga (ammoonium-oksalaat-kristallviolett);
3. Pesta preparaati ettevaatlikult mõne sekundi jooksul dest.veega;
4. Asetada preparaadile tilk värsket Lugoli lahust 1 minutiks;
5. Preparaati pesta dest. veega;
6. Dekoloreerida preparaati kuni 30 sek. jooksul 96 % etanooliga;
7. Pesta preparaati 5 sek. jooksul dest. veega ja kuivatada ettevaatlikult filterpaberi ribadega;
8. Värvida preparaati 20-30 sek. jooksul 0,25 % safraniini lahusega;
9. Preparaat pesta, kuivatada ja mikroskoopida õliimmersioonsüsteemis
Lihtsustatud metoodika
1. Valmistada märgpreparaat, lasta sel õhu käes kuivada ja fikseerida termiliselt;
2. Fikseeritud preparaati värvida 1 minuti jooksul Huckeri kristallvioletiga (ammoonium-oksalaat-kristallviolett);
3. Pesta preparaati ettevaatlikult mõne sekundi jooksul dest.veega;
4. Asetada preparaadile tilk värsket Lugoli lahust 1 minutiks;
5. Preparaati pesta dest. veega;
6. Kasutada safraniin-dekoloreerivat lahust ning jätta sellega preparaat seisma 20-50 sekundiks;
7. Preparaat pesta lõplikult
Pärast safraniiniga värvimist värvuvad GN bakterid punaseks, GP bakterid jäävad violetseks.
KIIRMEETOD: Kanda alusklaasile 2 tilka 3% KOH lahust;
suspendeerida bakterite agarkultuuri rakke aluse tilgal, rakkude lüüsil tekivad viskoossed niidid GN bakterite puhul.
Foto: Mati Roasto, 2010
Kuidas värvuvad termofiilsed kampülobakterid Gram-värvimisel?